GARP/LTGF-β細(xì)胞模型
發(fā)布時間:2026/01/06分類:技術(shù)文章來源:科佰生物
背景
TGF-β，尤其是異構(gòu)型TGF-β1，因其多效性作用在腫瘤進(jìn)展中起著重要作用。TGF-β是一種強(qiáng)效的免疫抑制細(xì)胞因子，影響抗腫瘤免疫反應(yīng)，并且還具有許多其他促腫瘤效應(yīng)，包括上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變、細(xì)胞增殖、細(xì)胞侵入和血管新生等。此外，TGF-β被報(bào)道與抗癌化療藥物以及免疫檢查點(diǎn)抑制劑的耐藥性相關(guān)。因此，TGF-β被視為主要的免疫檢查點(diǎn)，也是對治療反應(yīng)的預(yù)測和監(jiān)測標(biāo)志。然而，TGF-β也存在若干非活性形式，使其作為生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用變得困難。糖蛋白A重復(fù)優(yōu)勢蛋白（GARP）被認(rèn)為是潛在TGF-β（LTGF-β）的膜連接受體，GARP可促進(jìn)LTGF-β與整合素αvβ6或αvβ8相互作用，從而促進(jìn)生物活性TGF-β的釋放。GARP廣泛表達(dá)于多種細(xì)胞，尤其是在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）的表達(dá)可維持穩(wěn)態(tài)，發(fā)揮免疫抑制功能。除了Tregs，GARP還存在于活化B細(xì)胞、血小板、間充質(zhì)干細(xì)胞和肝恒星細(xì)胞的表面。在癌癥中，GARP已被報(bào)道通過腫瘤微環(huán)境中的Tregs和血小板表達(dá)。此外，GARP也可以由腫瘤細(xì)胞本身表達(dá)。因此，GARP可以廣泛存在于腫瘤中，在活性TGF-β的產(chǎn)生中發(fā)揮著重要作用。
GARP/LTGF-β的結(jié)構(gòu)和功能
GARP 基因位于人類染色體 9q34.3，GARP蛋白（也稱為 LRRC32）是一種約78 kDa的 I 型跨膜蛋白，由 662 個氨基酸組成，屬于亮氨酸富集重復(fù)序列（LRR）家族。GARP蛋白根據(jù)其一級序列在結(jié)構(gòu)上分為三個結(jié)構(gòu)域：細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域包含兩組 10 個 LRR，由一個富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)域和一個 C 端 LRR （LRRCT） 分隔。兩個保守的Cys殘基（Cys-192和Cys-331）分別位于第7和第12個LRR，負(fù)責(zé)潛在TGF-β的GARP和LAP的Cys-4之間形成兩個二硫鍵。
LTGF-β 是前體 TGF-β（pro-TGF-β）與潛伏相關(guān)肽（LAP）形成的復(fù)合物，TGF-β以無活性的同源二聚體前體蛋白形式合成，經(jīng)由類似于弗林蛋白酶的蛋白酶切割后形成LTGF-β 。GARP 能增強(qiáng)弗林蛋白酶依賴性切割，并與LTGF-β 結(jié)合。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的主要伴侶蛋白 gp96 確保 GARP 的正確折疊及其在細(xì)胞表面的表達(dá)。在細(xì)胞表面，GARP/LTGF-β復(fù)合物與α-β整合素（αVβ6 和αVβ8）結(jié)合，釋放成熟的 TGF-β 肽。成熟的 TGF-β 以自分泌和旁分泌的方式與細(xì)胞表面的 TGF-β 受體相互作用。在某些情況下，GARP/LTGF-β復(fù)合物也可以從細(xì)胞表面釋放，但如何從可溶性復(fù)合物中激活 TGF-β 尚不清楚。
靶向GARP/LTGF-β的藥物研發(fā)進(jìn)展
GARP作為 TGF-β 信號通路的關(guān)鍵調(diào)控因子，已成為腫瘤免疫治療和纖維化疾病領(lǐng)域的重要靶點(diǎn)。目前全球已有十余款 GARP/LTGF-β 靶向藥物進(jìn)入臨床階段，主要以單克隆抗體為主，部分雙特異性抗體和 CAR-T 療法也在積極研發(fā)中。
關(guān)于GARP/LTGF-β在研的部分藥物進(jìn)展如下表所示：
GARP/LTGF-β的細(xì)胞模型
為助力GARP/LTGF-β 靶點(diǎn)藥物研發(fā)，南京科佰開發(fā)了GARP/Latent TGF-β1 Target Cell、GARP/Latent TGF-β1 CHO細(xì)胞篩選模型，產(chǎn)品驗(yàn)證結(jié)果如下：
GARP/Latent TGF-β1 Target Cell CBP74395
Figure 3. Recombinant GARP/Latent TGF-β1 Target Cell stably expressing GARP&Latent TGF-β1.
Figure 4. Blocking of Human Latent TGF-β1 induced Integrin avβ6 Effector Reporter Cell(C17) Activity by GARP/TGF-β1 Blocking Ab with GARP/Latent TGF-β1 Target Cell(C5).Blocking of Human Latent TGF-β1 induced Integrin avβ6 Effector Reporter Cell(C17) Activity by Integrin avB6 Blocking Ab with GARP/Latent TGF-β1 Target Cell(C5).
GARP/Latent TGF-β1 CHO CBP74397
Figure 5. Recombinant GARP/Latent TGF-β1 CHO constitutively expressing GARP/Latent TGF-β1.
