低密度脂蛋白受體（LDLR）是主要位于肝細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白，核心功能是清除血液中的低密度脂蛋白（LDL），維持膽固醇穩(wěn)態(tài)。其結(jié)構(gòu)高度模塊化：配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域識(shí)別 LDL 上的載脂蛋白 B-100，EGF 同源結(jié)構(gòu)域響應(yīng) pH 變化，胞質(zhì)尾域介導(dǎo)內(nèi)吞信號(hào)。 LDLR 結(jié)合 LDL 后通過(guò)網(wǎng)格蛋白包被小窩內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞；在酸性?xún)?nèi)體中釋放 LDL，空受體 回收至細(xì)胞膜再利用，LDL 則被溶酶體降解供細(xì)胞使用。這一高效循環(huán)使 LDLR 能反復(fù)清 除膽固醇，是血脂調(diào)控的核心分子。

      PCSK9（前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素 9）主要由肝臟合成并分泌入血，是膽固醇代謝的關(guān)鍵負(fù)向調(diào)節(jié)因子。其前體經(jīng)自身催化切割后，前結(jié)構(gòu)域與催化域緊密結(jié)合，形成成熟蛋 白。PCSK9 不降解其他底物，而是作為分子伴侶特異性結(jié)合肝細(xì)胞表面的 LDLR，結(jié)合位 點(diǎn)為 LDLR 的 EGF-A 結(jié)構(gòu)域。

      PCSK9 與 LDLR 在細(xì)胞表面或內(nèi)吞過(guò)程中結(jié)合，親和力在酸性?xún)?nèi)體中顯著增強(qiáng)，形成緊密復(fù)合物。正常情況下，LDLR 在酸性?xún)?nèi)體釋放 LDL 后，會(huì)被回收蛋白（如 SNX17）識(shí)別并引導(dǎo)回細(xì)胞膜；但 PCSK9 的結(jié)合鎖定了 LDLR 的構(gòu)象，使其無(wú)法與回收蛋白結(jié)合，從 而阻斷回收途徑。LDLR-PCSK9 復(fù)合物隨內(nèi)體成熟進(jìn)入溶酶體被共同降解，肝細(xì)胞表面 LDLR 減少，血液 LDL 清除下降。PCSK9 抑制劑通過(guò)阻斷兩者結(jié)合，保護(hù) LDLR，顯著降低膽固醇，這一機(jī)制使 PCSK9 成為降脂靶點(diǎn)。

      Lnluc-LDLR CHO 藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) LDLR 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，原理見(jiàn)下圖所示。
 

 

Figure 1. Lnluc-LDLR CHO 細(xì)胞模型原理圖

Figure 2. Recombinant Lnluc-LDLR CHO stably expressing LDLR.

Figure 3. Dose Response of Recombinant Human PCSK9Snluc in Lnluc-LDLR CHO(C10).


Figure 4. Binding Blockade Between Recombinant Human PCSK9Snluc&Lnluc-LDLR CHO(C10) by PCSK9 Neutralization Ab.